Pencitraan sel hidup memerlukan mikroskopItu meminimumkan phototoxicity, mengekalkan daya maju sel, dan menyediakan pengimejan resolusi tinggi dari masa ke masa. Pilihan biasa termasuk:
1. Mikroskop pendarfluor terbalik:
Mikroskop Widefield: Dilengkapi dengan kawalan alam sekitar (suhu, CO₂, kelembapan) dan kamera sensitif (mis., SCMOS). Selalunya dipasangkan dengan kontras fasa atau DIC (perbezaan gangguan perbezaan) untuk pencitraan bebas label.
Spinning Disk Confocal: Mengurangkan photobleaching dengan pengimbasan lebih cepat berbanding dengan pengimbasan laser tradisional. Sesuai untuk proses dinamik.
2. Mikroskopi pendarfluor lembaran cahaya (LSFM):
Menggalakkan hanya satah fokus, secara drastik mengurangkan pendedahan cahaya dan membolehkan pencitraan jangka panjang (mis., Jam hingga hari).
3. Mikroskopi dua-foton:
Menggunakan cahaya inframerah berhampiran untuk penembusan tisu yang lebih mendalam dan dikurangkan fototoksisiti, sesuai untuk sampel tebal seperti budaya 3D.
4. Tirf (jumlah pendarfluor refleksi dalaman):
Menggambarkan peristiwa diMembran sel(mis., Pengedaran vesicle) dengan pengimejan seksyen optik nipis (~ 100 nm).
5. Mikroskop resolusi super (mis., Sted, Sim):
Mencapai resolusi yang lebih tinggi tetapi memerlukan pengoptimuman yang teliti untuk mengimbangi pendedahan cahaya dan kesihatan sel.
6. Sistem yang dioptimumkan sel hidup:
Menggabungkan ruang alam sekitar, optik penyesuaian, dan pengesan cahaya rendah (mis., Kamera EM-CCD).
Ciri -ciri utama untuk pencitraan langsung:
- Kawalan Alam Sekitar: Mengekalkan suhu, CO₂, dan kelembapan.
- Pengambilalihan Cepat: Meminimumkan gerakan kabur untuk proses dinamik.
- Fototoxicity yang rendah: Penapis, sumber cahaya LED, atau pencahayaan lembaran cahaya mengurangkan kerosakan.
Pilih berdasarkan keperluan resolusi, tempoh pengimejan, dan kepekaan sampel.
